יקערדיק עצות פֿאַר די קריפּרעססערוואַטיאָן פון צעל קאַלטשערז

יקערדיק עצות פֿאַר די קריפּרעססערוואַטיאָן פון צעל קאַלטשערז

סעלז פאָרזעצן זייער מאַטאַבאַליזאַם בעשאַס נאָרמאַל וווּקס אַקטיוויטעטן, וואָס ריקווייערז די אָנטייל פון פאַרשידן פּראָוע ווען די טעמפּעראַטור דראָפּס אונטער -70 ° C, פּראָוסיסאַז האַלטן ארבעטן. דעריבער, אין אַ סוויווע מיט גאָר נידעריק טעמפּעראַטורעס, סעלז קענען האַלטן זייער מעטאַבאַליק אַקטיוויטעטן און אַרייַן אַ דאָרמאַנט שטאַט אַז אַלאַוז לאַנג-טערמין סטאָרידזש.

1. יקספּערמענאַל מאַטעריאַלס

באַזע מאַטעריאַל:

יקערדיק קולטור מעדיום

סערום (קאַנווענשאַנאַל פבס / נבס)

ולטראַפּייטשער ווערקבענטש

סטערילע דימטהיל סולפאָקסידע (דמסאָ)

סטערילע פּבס פאָספאַטע באַפער זאַלץ לייזונג

פּיצע

עלעקטריק פּאָקקעטטינג ביקס

צוגרייטונג פון די יקספּעראַמאַנץ

אַ) צוגרייטונג פון די ייַז קאַלט לייזונג:

אַלגעמיינע סעלז: 55% בייסאַל מיטל + 40% באַווינונג סערום (פבס / נבס) + 5% דמסאָ

וויטאַל סעלז: 90% באָווינע סערום (פבס / נבס) + 10% דמסאָ

אַליוקאָט די צוגעגרייט קריפּרעססערוואַטיאָן לייזונג אין אַ 15 מל Centrifufg Tuber [Nest] און סטאָר ביי 4 ° C פֿאַר שפּעטער נוצן.

(b) צוגרייטונג פון סעלז צו זיין פאַרפרוירן:

אויסקלייַבן סעלז איידער די סעלז מיט גוט וווּקס און אין די לאָגאַריטהמיק וווּקס פאַסע און פאַרבייַטן זיי מיט פריש מיטל 12-24 שעה איידער ייַז קאַלט צו טייַנען צעל צושטאַנד.

2. יקספּערמענאַל פּראָצעדור

1. אָבסערווירן די געדיכטקייַט פון די סעלז צו זיין פאַרפרוירן, וואָס איז וועגן 80% ~ 90%. ניצן אַ פּיפּעטטע ביקס צו אַספּיראַטע די אַלט מיטל, לייגן סטערילע פּב צו וואַשן די סעלז 1-2 מאל און באַזייַטיקן די רוען מיטל אין דער רוען מיטל.

2. לייג אַ צונעמען סומע פון ​​טריפּסין אָדער דיגעסטיווע זאַפט צו לאָזן די טריפּסין צו אַרייַן די סעלז, און שטעלן זיי אין די ינגקיאַבייטער פֿאַר דיידזשעסטשאַן. אָבסערווירן די צושטאַנד פון די סעלז אונטער די מיקראָסקאָפּ: די סיטאָפּלאַסם איז ריטראַקטינג און די סעלז זענען ניט מער פארבונדן אין שיץ. אין דעם פונט, לייגן די האַלטן לייזונג צו האַלטן די דיידזשעסטשאַן פּראָצעס.

3. דזשענטלי בלאָז די סעלז מיט אַ שפּיץ צו פאָרעם אַ צעל סאַספּענשאַן און סענטריפוגערן די צעל סאַספּענשאַן פון 1000 רפּם פֿאַר 3-5 מינוט.

אַוועקוואַרפן די סופּערנאַטאַנט, לייגן אַ צונעמען סומע פון ​​ייַז קאַלט לייזונג, און דזשענטלי פּייפּעט צו מאַכן די סעלז ציילן יונאַפאָרמלי. סטרויערן די צעל געדיכטקייַט מיט קריפּרעססערוואַטיאָן מעדיום צו מאַכן די לעצט געדיכטקייַט 5 × 106 / מל ~ 1 × 107 / מל.

4. ניצן אַ פּייפּעטטע ביקס צו באַזונדער די קריאָגעניק טובז לויט די דערוואַרט קאַפּאַציטעט און נוצן אַ אָטאַמאַטיק קאַפּינג מאַשין צו היטל און פּלאָמבע.

5. דער נאָרמאַל קריפּרעסוועראַטיאָן פּראָגראַם איז אַ קאָאָלינג קורס פון -1 ° C צו -2 ° C / מין, און די סעלז צו זיין פאַרפרוירן קענען זיין ביסלעכווייַז פאַרפרוירן ווערט: צימער טעמפּעראַטור → 4 ° C (20 מין) → - 20 ° C (30 מין) → -80 ° C ° C (יבערנאַכטיק) → לאַנג-טערמין סטאָרידזש אין פליסיק ניטראָגען.

עס קענען אויך זיין סטאָרד גלייַך אין אַ פריזער ביי -80 ° C יבערנאַכטיק און דעמאָלט טראַנספערד צו פליסיק ניטראָגען פֿאַר סטאָרידזש.

יאָנגיו מעדיקאַל איז אַ הויך-טעק ענטערפּרייז ספּעשאַלייזינג אין ר & די, פּראָדוקציע און פארקויפונג פון ביאָמעדיקאַל קאָנסומאַבלעס. פּיפּס פון פּיפּס, פּיפּעטטעס, פּקר טעלער, צעל קולטור פּראָדוקטן און אנדערע בייאַלאַדזשיקאַל לאַבאָראַטאָריע קאָנסומאַבלעס. יאָנגייוע מעדיקאַל איז ווערט פון דיין צוטרוי און ברירה! ברוכים הבאים צו באַראַטנ זיך!